PML-RARA, Hibridação in situ, Vários Materiais

Orientações aos clientes

• Exame realizado em material de medula óssea ou sangue periférico.
• A coleta de medula óssea pode ser realizada no laboratório, mediante agendamento prévio.
• Material colhido fora do laboratório, deverá ser entregue refrigerado até 24 horas após a coleta.

Orientações necessárias

• Exame realizado em material de medula óssea ou sangue periférico.
• A coleta de medula óssea pode ser realizada no laboratório, mediante agendamento prévio.
• Material colhido fora do laboratório, deverá ser entregue refrigerado até 24 horas após a coleta.

Processamento e adequação da amostra

• Encaminhar a amostra sob refrigeração, o mais rápido possível, à seção, com a folha de trabalho, etiquetas com código de barras, questionário preenchido e cópia da receita médica.

Estabilidade da amostra:

Temperatura ambiente: não aceitável;

Refrigerada (2-8 ºC): 24 horas;

Congelada (-20 ºC): não aceitável.

Método

• Hibridação "in situ" por fluorescência. Trata-se de reação onde se usa sonda (DNA) marcada com fluorocromo que vai se ligar ao DNA alvo complementar.
• São contadas 300 intérfases por 2 ou mais obsevadores.

Valor de referência

• Controle Normal: 10% de células com rearranjo.
• Paciente: > 10% de células com rearranjo.

Interpretação e comentários

• FISH é um método citogenético-molecular, no qual se utiliza de uma seqüência de DNA marcada (sonda) complementar ao DNA alvo que se pretende estudar. Pode ser feito tanto em metáfase como em intérfase. No caso de leucemia promielocítica aguda (LPA ou LMA-M3), é particularmente útil porque detecta o rearranjo gênico PML/RARA, que ocorre em aproximadamente 90% dos casos, e é o equivalente molecular da translocação entre os cromossomos 15 e 17. É exame rápido, sensível e específico.