Mycobacterium avium e M. intracellulare, pesquisa por PCR, Vários Materiais

Orientações necessárias

Este exame pode ser feito em lavado broncoalveolar, minilavado broncoalveolar, aspirado ou secreção traqueal e escarro.

• A coleta de lavado broncoalveolar é realizada durante a broncoscopia e, portanto, requer agendamento prévio.
• O Fleury também analisa amostras enviadas não colhidas no Fleury (lavado broncoalveolar, minilavado broncoalveolar secreção ou aspirado traqueal) desde que sejam entregues em até 72 horas após a coleta se mantidas sob refrigeração (2- 8ºC) ou 30 dias congeladas (abaixo de -20ºC).

Para escarro, é necessário retirar previamente no Fleury as instruções e o kit para a coleta de escarro, que deve ser feita em casa, antes do café-da-manhã. O material deve ser entregue em até 72 horas após a coleta se mantidas sob refrigeração (2- 8ºC).

Processamento e adequação da amostra

1. Lavado broncoalveolar ou minilavado broncoalveolar

• Não centrifugar
• Enviar mínimo de 2 mL de lavado broncoalveolar, em frasco estéril.

2. Escarro

• Não centrifugar
• Enviar mínimo de 2 mL de escarro, em frasco estéril, refrigerado. NÃO congelar.

3. Aspirado ou secrção traqueal

• Não centrifugar
• Enviar mínimo de 2 mL de escarro, em frasco estéril.

Lavado ou minilavado broncoalveolar:

Temperatura ambiente: não aceitável

Refrigerada (2-8ºC): 72 horas;

Congelada (-20ºC): 1 mês

Escarro:

Temperatura ambiente: não aceitável

Refrigerada (2-8ºC): 72 horas;

Congelada (-20ºC): não aceitável

Aspirado ou Secreção traqueal:

Temperatura ambiente: não aceitável

Refrigerada (2-8ºC): 72 horas;

Congelada (-20ºC): 1 mês"

Método

PCR multiplex em tempo real (qPCR)

Valor de referência

Negativo (indetectado)

Interpretação e comentários

Dentre as espécies que constituem o Complexo Mycobacterium avium, as espécies Mycobacterium avium e Mycobacterium intracellulare são as mais frequentemente isoladas em infecções clínicas, sendo reconhecidas como patógenos oportunistas em humanos. Os principais quadros clínicos observados são: acometimento pulmonar em pacientes com pneumopatias prévias (como bronquiectasias) ou infecção disseminada em pacientes com imunossupressão grave.

Este teste consiste na amplificação de DNA do gene rRNA 16S para detecção e diferenciação especificamente das espécies M. avium e M. intracellulare e, deste modo, não exclui a possibilidade de infecção por outras espécies de micobactérias. A infecção por M. tuberculosis deve ser descartada através de PCR específica para essa espécie (BKPCR).

Como outras espécies de micobactérias não tuberculosas (MNT), a M. avium e a M. intracellulare podem ser encontradas em diversas fontes ambientais, como água e solo, ou em animais. A confirmação do diagnóstico deve levar em consideração a correlação clínica do resultado laboratorial, especialmente quando a detecção ocorrer em materiais não estéreis, como nas amostras de escarro.