Instabilidade de microssatélites (MSI), Detecção por PCR, bloco de parafina

Orientações aos clientes

• Este exame é feito somente com pedido médico.
• Para a realização da análise, há necessidade de uma amostra de sangue e de um fragmento de tecido obtido por biópsia ou ressecção cirúrgica.
• Materiais colhidos fora do laboratório devem ser entregues conforme as condições abaixo:

-- sangue total refrigerado, encaminhado até 24 horas após a coleta;

-- fragmento de tecido fixado em formol 10% e acondicionado em recipiente apropriado, ou incluído em parafina, sempre com a devida identificação do cliente.

Orientações necessárias

• Este exame é feito somente com pedido médico.
• Para a realização da análise, há necessidade de uma amostra de sangue e de um fragmento de tecido obtido por biópsia ou ressecção cirúrgica.
• Materiais colhidos fora do Fleury devem ser entregues conforme as condições abaixo:

-- sangue total refrigerado, encaminhado até 24 horas após a coleta;

-- fragmento de tecido fixado em formol 10% e acondicionado em recipiente apropriado, ou incluído em parafina, sempre com a devida identificação do cliente.

Processamento e adequação da amostra

• Sangue:
• Receber a amostra em embalagem REF e mante-la nesta condição.

-- não manusear;

-- encaminhar em embalagem REF à seção até 24 horas após a coleta.

• Fragmento de tecido obtido por biópsia, incluído ou não em parafina:

-- não manusear;

-- encaminhar à seção até 24 horas após a coleta.

Estabilidade da amostra:

Temperatura ambiente: 8 dias;

Refrigerada (2-8 ºC): 8 dias;

Congelada (-20 ºC): não aceitável.

Método

• Reação em cadeia da polimerase (PCR) multiplex seguido por sequenciamento

Valor de referência

• Ausência de instabilidade de microssatélites.

Interpretação e comentários

Este painel é composto por cinco marcadores microsatélites Bethesda que são constituídos por duas repetições de mononucleotídeos (BAT25 e BAT 26) e três repetições de trinucleotídeos (D5S346, D2S123 e D17S250). Este painel de marcadores é indicado somente na investigação de neoplasia colorretal. O tumor é classificado como tendo alta instabilidade se dois ou mais dos cinco marcadores mostrarem instabilidade. Ele é classificado como de baixa instabilidade se um dos marcadores mostrar instabilidade. E considerado sem instabilidade se nenhum marcador mostrar instabilidade. Recomenda-se que se realize análise mutacional de genes de reparo do DNA (MLH1, MSH2, and MSH6) caso a amostra mostre alto grau de instabilidade.