Hibridação in situ, por fluorescência, para mieloma múltiplo, Vários Materiais

Orientações aos clientes

• O exame é realizado em material de medula óssea.
• Atenção:

Esse exame possui restrição de atendimento nas unidades em relação a dias da semana e horários. Para mais é importante consultar a Central de Atendimento.

Orientações necessárias

• O exame é realizado em material de medula óssea.
• Atenção:

Esse exame possui restrição de atendimento nas unidades em relação a dias da semana e horários. Para mais é importante consultar a Central de Atendimento.

Processamento e adequação da amostra

• Encaminhar o material o mais rápido possível (período de 24 horas), sob refrigeração, ao setor, juntamente com o questionário previamente preenchido pelo cliente e receita médica impressa ou digitalizada.

Atenção: Somente serão aceitas amostras colhidas em heparina sódica ou em EDTA.

Método

• Hibridação "in situ" por fluorescência.é uma reação que utiliza uma sonda molecular (sequência de DNA) marcada com fluorocromo que vai se ligar ao DNA alvo complementar.

A técnica de hibridação "in situ" por fluorescência é de elevada especificidade e sensibilidade, permitindo visualizar fragmentos de DNA mediante sua marcação e posterior análise ao microscópio de fluorescência. Em Mieloma Múltiplo a técnica de FISH é realizada após a

separação dos plasmócitos por microesferas magnéticas marcadas com DC138+.

• São analisadas de 100 a 200 intérfases por dois ou mais analistas.

Pede-se que o cliente tome ciência de que, mediante escassez de plasmócitos na amostra, não serão realizadas toda as pesquisas que compõem o painel mieloma múltiplo. A escolha das pesquisas terá como base: a relevância na estratificação de prognóstico ou na determinação do médico assistente.

Valor de referência

1)- CDKN2C quando deleção > 5,7% e CKS1B quando duplicação > 5,7% de células com sinais anômalos.

2)- ATM quando deleção > 5,6% de células com sinais anômalos.

3)- RB1 quando deleção > 5,6% de células com sinais anômalos.

4)- TP53 quando deleção > 6,2% e monossomia 17 quando > 6,2% de células com sinais anômalos.

5)- MYB quando deleção > 4,5% de células com sinais anômalos.

6)- IGH/FGFR3 quando > 6,2% de células com sinais anômalos.

7)- IGH/CCND1 quando > 6,8% de células com sinais anômalos.

8)- IGH/MAF quando > 6,2% de células com sinais anômalos.

9)- IGH/MAFB quando > 6,2% de células com sinais anômalos.

Interpretação e comentários

O FISH para Mieloma Múltiplo (MM) foi elaborado para permitir a detecção das anormalidades genéticas mais frequentes nessa doença. As alterações são pesquisadas nos plasmócitos (células que estão com crescimento alterado nessa doença). As anormalidades mais encontradas são: deleção do gene MYB no cromossomo 6, deleção do gene ATM no cromossomo 11, deleção de regiões do cromossomo 13: na proximidade dos genes RB1 e LAMP1 e a deleção do gene TP53 no braço curto do cromossomo 17, a pesquisa dos rearranjos IGH/FGFR3, IGH/CCND1, IGH/MAF, IGH/MAFB. Este exame tem importância não apenas por questões prognósticas, mas também porque auxilia a orientação terapêutica.