Hibridação in situ, por fluorescência, para LLC, Vários Materiais

Orientações aos clientes

I- Critérios de realização

O exame é realizado em material de medula óssea ou em sangue periférico.

II - Para coletas no Laboratório:

• A coleta de amostra em medula óssea precisa ser marcada com antecedência.

Orientações necessárias

I- Critérios de realização

O exame é realizado em material de medula óssea ou em sangue periférico.

II - Para coletas no Fleury

• A coleta de amostra em medula óssea precisa ser marcada com antecedência.

Processamento e adequação da amostra

• Encaminhar o material o mais rápido possível (período de 24 horas), sob refrigeração, ao setor, juntamente com o questionário previamente preenchido pelo cliente e receita médica impressa ou digitalizada.

Atenção: Somente serão aceitas amostras colhidas em heparina sódica ou em EDTA.

Método

• Hibridação "in situ" por fluorescência.
• Trata-se de reação onde se usa sonda molecular (sequência de DNA) marcada com fluorocromo, a qual se liga ao DNA alvo complementar.
• São analisadas 200 intérfases por 2 ou mais observadores.

Valor de referência

1- deleção ATM quando > 5.6% das células apresentarem apenas um sinal correspondentes à região 11q22.3;

2- trissomia 12 quando > 5.0% das células com três sinais correspondentes ao centrômero do 12;

3- deleção RB1 quando > 5.6% das células apresentarem apenas um sinal correspondente à região D13S31-D13S25;

4- monossomia 17 quando > 6.2% das células apresentarem apenas um sinal correspondente à região D17Z1 e 17p13.1 (Glasman et al., 2005);

5- deleção MYB quando > 4.51% das células apresentarem um sinal correspondente à região 6q23.3.

6- IGH quando > 4.4% de células com sinais anômalos.

7- deleção TP53: quando > 6,2% das células apresentarem sinais anômalos.

8- Rearranjo IGH/CCND1: quando > 6,8% das células apresentarem sinais anômalos.

9- Rearranjo IGH/BCL2: quando > 6,2% das células apresentarem sinais anômalos.

Interpretação e comentários

O painel para Leucemia Linfocítica Crônica (LLC) foi elaborada para permitir a detecção das anormalidades genéticas mais frequentes nessa neoplasia, ou seja, a trissomia do cromossomo 12, deleção do gene MYB no cromossomo 6, deleção do gene ATM no cromossomo 11, deleção do gene RB1 e a deleção do gene TP53 no braço curto do cromossomo 17. Além disso, permite a pesquisa dos rearranjos IGH/CCND1, IGH/BCL2 e IGH BAR. Este exame é indicado no diagnóstico, no prognóstico e no monitoramento da doença.