Fator de von Willebrand, quantificação, plasma

Orientações aos clientes

• Após dieta leve, o jejum não é necessário. Caso contrário, sugere-se jejum de três horas.
• Nas três horas que antecedem o exame, o cliente não deve fazer exercícios físicos.
• O cliente precisa informar todos os medicamentos tomados nos últimos sete dias.

Orientações necessárias

• Após dieta leve, o jejum não é necessário. Caso contrário, sugere-se jejum de três horas.
• Nas três horas que antecedem o exame, o cliente não deve fazer exercícios físicos.
• O cliente precisa informar todos os medicamentos tomados nos últimos sete dias.

Processamento e adequação da amostra

Verificar:

Se há presença de coágulo, invertendo gentilmente o tubo. Se houver, recusar o material.

Se o volume de sangue + o anticoagulante atingiu 90% ou mais do nível do tubo (observar tabela com referência de preenchimento).

Se o volume estiver incorreto, solicitar coleta de novo material ou em caso de dúvida contatar um colaborador do Setor de Hemostasia.

PREPARO DO MATERIAL A SER ENVIADO CONGELADO (plasma pobre em plaquetas)

1) Em até 3 horas após a coleta, centrifugar a amostra em temperatura ambiente ou a 18 ºC por 15 minutos a 2.200 g.

2) Retirar o material da centrífuga e observar se o paciente tem hematócrito alto (utilizar tabela).

Se a papa de hemácias for superior ao limite indicado, isto significa que o paciente tem hematócrito superior a 55%.

Nesta situação, avisar e encaminhar o material aos cuidados de um colaborador do Setor de Hemostasia.

Amostra hemolisada: consultar a régua de hemólise (vide ITR-.DIS-00059)

Procedimento para amostra hemolisada:

Comparar a amostra hemolisada com a régua de hemólise para checar o índice hemolítico seguindo as orientações abaixo:

* Amostra com índice hemolítico até 30 mg/dL - liberar resultado sem nota

* Amostra com índice hemolítico de 40, 50 e 60 mg/dL - liberar resultado com nota

* Amostra com índice hemolítico maior ou igual a 70 mg/dL - solicitar nova coleta

3) Identificar um tubo plástico de 4,0 mL, separar cuidadosamente o plasma com pipeta plástica sem tocar na camada onde estão as plaquetas e sem formar "espuma".

Volume mínimo de plasma: 1,0 mL

4) Tampar.

5) Colocar o material no gelo seco.

6) Encaminhar o material para o Setor de Hemostasia congelado em gelo seco.

Estabilidade da amostra:

Temperatura ambiente: não aceitável;

Refrigerada (2-8 ºC): 4 horas em tubo primário ou plasma;

Congelada (-20 ºC): 2 semanas;

Congelada (-70 ºC): 6 meses.

Método

• Imunoturbidimétrico (LIA).

Valor de referência

66 - 175%.

Interpretação e comentários

• O fator de von Willebrand (FvW) é uma família de proteínas multiméricas, produzidas nos megacariócitos e nas células endoteliais, que variam em capacidade funcional e tamanho (PM entre 800.000 e 20 milhões de dáltons). Encontrado nas células endoteliais, plaquetas e plasma, o FvW atua como proteína carregadora do fator VIII, estabilizando sua atividade coagulante e protegendo-o da degradação, e exerce papel fundamental na adesão da plaqueta ao subendotélio.
• A determinação do antígeno de von Willebrand é útil para o auxílio diagnóstico na doença de von Willebrand (DvW), a afecção hereditária mais comum da Hemostasia, com prevalência populacional de aproximadamente 1%. A DvW ocorre em ambos os sexos, em todos os grupos étnicos, e, em muitos casos, os indivíduos permanecem sem ser diagnosticados. A doença decorre de redução, ausência ou defeito molecular do fator de von Willebrand, mas, qualquer que seja a causa, o diagnóstico depende de um conjunto de testes de Hemostasia (veja a relação abaixo) Já foram descritos mais de 20 subtipos de DvW, porém mais de 70% dos portadores apresentam o tipo I ou a DvW clássica.
• O diagnóstico laboratorial da DvW pode ficar dificultado devido às flutuações que o FvW sofre por ser uma proteína de fase aguda. Existe a possibilidade de que, num mesmo indivíduo, o nível do FvW (FvWAg) varie de época para época. Cerca de 50% dos portadores de DvW leve podem apresentar resultados normais se forem testados somente em uma ocasião. Dessa forma, só é possível fechar o diagnóstico após a repetição dos testes com intervalo de semanas ou meses. Vale lembrar que os níveis de FvW em pessoas do grupo sanguíneo O são, em média, menores que os dos outros grupos sangüíneos.
• Em síntese, o diagnóstico laboratorial da doença de von Willebrand se baseia nos resultados dos seguintes testes:

-- tempo de tromboplastina parcial ativada;

-- tempo de sangramento de Ivy;

-- atividade do co-fator da ristocetina;

-- antígeno de von Willebrand (FvWAg);

-- fator VIII:C;

-- análise dos multímeros do FvW (para diferenciação dos subtipos da doença).

• Convém ressaltar que níveis elevados do FvW podem ocorrer também em outras situações, tais como:

-- dano do endotélio vascular (vasculites, período pós-operatório, neoplasias, processo infeccioso e doença hepática ou renal);

-- processo inflamatório agudo;

-- após exercício ou estresse;

-- durante a gestação e no uso de estrógenos (terapia de reposição hormonal ou anticoncepcional oral).