EXAME IMUNOCITOQUIMICO, PESQUISA DE P16 E Ki67, material vaginal e colo uterino

Orientações aos clientes

Este exame é feito nos materiais abaixo, que podem ser colhidos no Laboratório ou enviados conforme as especificações também descritas a seguir:

Para materiais enviados: Materiais citológicos colhidos (cervical/cérvico-vaginal) em MEIO LÍQUIDO: ThinPrep, Cobas PCR ou SurePath. No laboratório: - Critérios de realização

• Necessário apresentar pedido médico.
• Cliente com idade inferior a 18 anos, necessário estar acompanhado de um responsável legal no dia do exame.
• Este exame é efetuado em amostra colhida nas Unidades de Atendimento ou em material enviado em frasco de citologia em base líquida.
• Esse exame é realizado somente com pedido médico.

II - Preparo

• Nas 48 horas anteriores ao exame, é necessário seguir os cuidados abaixo:

-- não usar creme e/ou óvulo vaginal;

-- não utilizar ducha nem fazer lavagem interna;

-- não realizar exame ginecológico com toque, ultra-sonografia transvaginal e/ou ressonância magnética da pelve;

-- não manter relações sexuais com ou sem uso de preservativo;

-- A coleta não deve ser feita durante a menstruação, exceto se o médico do cliente solicite a realização durante esse período.

-- Exame poderá ser realizado em sangramento não menstrual.

Orientações necessárias

• Critérios de realização
• Necessário apresentar pedido médico.
• Cliente com idade inferior a 18 anos, necessário estar acompanhado de um responsável legal no dia do exame.
• Este exame é efetuado em amostra colhida nas Unidades de Atendimento ou em material enviado em frasco de citologia em base líquida.
• Esse exame é realizado somente com pedido médico.

II - Preparo

• Nas 48 horas anteriores ao exame, é necessário seguir os cuidados abaixo:

-- não usar creme e/ou óvulo vaginal;

-- não utilizar ducha nem fazer lavagem interna;

-- não realizar exame ginecológico com toque, ultra-sonografia transvaginal e/ou ressonância magnética da pelve;

-- não manter relações sexuais com ou sem uso de preservativo;

-- A coleta não deve ser feita durante a menstruação, exceto se o médico do cliente solicite a realização durante esse período.

-- Exame poderá ser realizado em sangramento não menstrual.

• Este exame é feito nos materiais abaixo, que podem ser colhidos no Fleury: ou enviados conforme as especificações também descritas a seguir:
• Materiais citológicos (cervical/cérvico-vaginal) colhidos em MEIO LÍQUIDO: ThinPrep, Cobas PCR ou SurePath

III - Restrição de horário

• Para este procedimento,é necessário contatar a central de atendimento, pois em algumas unidades este exame é agendado.
• Caso tenha na solicitação médica exames de COLPOSCOPIA ou VULVOSCOPIA, a coleta do CITOBLIQ será realizada junto com esses exames.

--Material enviado:

O Fleury recebe material para esta análise em qualquer uma de suas unidades e em todo o período de atendimento.

Processamento e adequação da amostra

• Só realizamos em materiais citológicos (cervical/ cérvico-vaginal) colhidos em MEIO LIQUIDO: ThinPrep, Cobas PCR ou SurePath).

Enviar o material para o AP em temperatura ambiente.

• É necessário o envio de questionário específico, disponível no site do laboratório, corretamente preenchido.

MATERIAL PARA COLETA:

• Espéculo
• Frasco de coleta SurePath
• Escova de coleta cervical (paciente virgem)

ATENÇÃO

• Caso solicitado CITOBLIQ + exame de urina, colher primeiro a urina.
• Nas 48 horas anteriores ao exame, é necessário seguir os cuidados abaixo:

-- não usar creme e/ou óvulo vaginal;

-- não utilizar ducha nem fazer lavagem interna;

-- não realizar exame ginecológico com toque, ultra-sonografia transvaginal e/ou ressonância magnética da pelve;

-- não manter relações sexuais com ou sem uso de preservativo;

• Idealmente, a coleta não deve ser feita durante a menstruação, mas pode ser realizada em vigência de sangramento não-menstrual.

Clientes não virgens e não gestantes

• Colocar luva de procedimento
• Passar espéculo para localização do colo uterino
• Remover secreção/muco abundante com o auxilio da espátula com gaze (parede vaginal e ectocervix) ou com ceconete (cervical) antes da coleta do material garantindo uma amostra de qualidade (rica em células) e evitando problemas no equipamento.
• Posicionar as cerdas mais longas da escova no canal endocervical
• As cerdas laterais devem se espalhar sobre a ectocérvice e as centrais devem penetrar completamente no canal endocervical
• Mantendo uma pressão suave, girar a escova duas vezes no sentido horário.
• Retirar a escova do canal endocervical e passar as cerdas laterais, no fundo de saco e no terço médio da parede vaginal direita e esquerda.
• Destacar a cabeça da escova, colocando-a no frasco Surepath contendo o meio liquido
• Fechar o frasco
• Certificar-se de que o frasco está fechado (para evitar perda do material).
• Retirar a luva de procedimento.
• Lavar as mãos.
• Encaminhar o frasco identificado, a ficha de atendimento e os questionários para distribuição ou acondicionar no malote (unidade sem distribuição)

Cliente Gestante ou com suspeita de gravidez

• Passar espéculo
• Não coletar material do canal endocervical e não utilizar escova do kit.
• Com a espátula plástica (tipo Ayre) coletar material do ectocérvice, fundo de saco e terço médio interno da parede vaginal direita e esquerda.
• Lavar imediatamente a espátula no frasco SurePath contendo a solução liquida, seguida de batidas vigorosas na parede lateral do frasco, agitando várias vezes a alça no líquido para desprender melhor o material coletado.
• Fechar o frasco
• Certificar-se de que o frasco está fechado (para evitar perda do material).
• Retirar a luva de procedimento
• Lavar as mãos.
• Anotar na ficha de atendimento: "CLIENTE GESTANTE"
• Encaminhar o frasco identificado, a ficha de atendimento e os questionários para distribuição ou acondicionar no malote (unidade sem distribuição)

Cliente Virgem

• Não passar espéculo
• Colher material vaginal com a escova endocervical tradicional, introduzindo toda a parte das cerdas da escova e rodar 360°, com delicadeza, suavemente e com movimentos giratórios, como se estivesse rodeando o colo e raspando as paredes vaginais e fundo-de-saco.
• Lavar imediatamente a escova no frasco SurePath contendo a solução liquida, seguida de batidas vigorosas na parede lateral do frasco, agitando várias vezes a alça no líquido para desprender melhor o material coletado.
• Fechar o frasco
• Certificar-se de que o frasco está fechado (para evitar perda do material).
• Retirar a luva de procedimento.
• Lavar as mãos.
• Anotar na ficha de atendimento: cliente virgem
• Encaminhar o frasco identificado, a ficha de atendimento e os questionários para distribuição ou acondicionar no malote (unidade sem distribuição)

Clientes histerectomizadas

• Passar espéculo
• Colher, delicadamente, com a escova material vaginal (paredes e cúpula vaginal ou fundo cego)
• Destacar a cabeça da escova no frasco Surepath contendo o meio liquido
• Fechar o frasco
• Certificar-se de que o frasco está fechado (para evitar perda do material).
• Retirar a luva de procedimento,
• Lavar as mãos.
• Anotar na ficha de atendimento: cliente histerectomizada
• Encaminhar o frasco identificado, a ficha de atendimento e os questionários para distribuição ou acondicionar no malote (unidade sem distribuição)

Cliente em uso de DIU

• Deve-se explicar para a cliente que o procedimento é seguro, com risco mínimo e desprezível de que o DIU saia do lugar.
• O procedimento é idêntico ao padrão de clientes não virgens e não gestantes.
• Deve-se ter especial cuidado ao introduzir e girar a escovinha na endocérvice.
• Avisar a cliente que se está visualizando (ou não) o fio do DIU.
• Anotar na ficha de atendimento: "Cliente com DIU, visualizado (ou não) o fio".
• Encaminhar o frasco identificado, a ficha de atendimento e os questionários para distribuição ou acondicionar no malote (unidade sem distribuição)

Atenção:

• Em caso de alterações no local de coleta ou queixas da cliente, solicitar presença do Médico (setor de Colposcopia) para avaliação e coleta do exame.
• Em casos onde não se consiga visualizar o orifício externo do colo e um dos médicos da Colposcopia não estiver presente para auxiliar, a coleta deve ser feita da superfície cervical que se vê, do fundo-de-saco e paredes vaginais. Anotar na ficha de atendimento e comunicar ao AP, anotando na ficha branca do questionário.
• Quando observado sangramento no momento da coleta no canal endocervical (escova), comunicar à cliente que houve um sangramento que normalmente cessa sozinho; caso contrário, solicitar que entre em contato via Central de Atendimento.
• Quando a vagina estiver ressecada (comum em mulheres idosas e menopausadas), umedecer previamente com salina estéril os materiais a serem utilizados.
• Enviar o material colhido em frasco coletor para citologia em base liquida em temperatura ambiente. (frasco da BD SurePath).

Método

-Consiste na expressão imunocitoquimica simultânea das proteínas P16 e KI67 em amostras citológicas obtidas no colo uterino.

-As proteínas são detectadas por um coquetel de anticorpos primários e visualizado por uma reação colorimétrica através de dois substrato-DAB e Fast Red resultando em um precipitado acastanhado no antígeno P16 e precipitado vermelho no KI67 respectivamente. -A positividade do teste é visualizada precisamente no núcleo e citoplasma das células infectadas.

Valor de referência

Resultado NEGATIVO (ausência de co-localização p16/Ki67)

Interpretação e comentários

Resultado de teste positivo

A presença de uma ou mais células epiteliais do colo do útero com a co-localização de

imuno-coloração citoplasmática castanha específica e imuno-coloração nuclear vermelha

específica dentro da mesma célula é interpretada como um resultado de teste

CINtec PLUS Cytology positivo.

Resultado de teste negativo

Se nenhuma célula epitelial do colo do útero apresentar simultaneamente imunocoloração citoplasmática castanha e imuno-coloração nuclear vermelha, o resultado do

teste CINtec PLUS Cytology é considerado negativo.

A presença de células epiteliais do colo do útero que apresentem imunorreactividade

apenas para um e não para ambos os marcadores (como coloração castanha apenas

para p16INK4a ou coloração vermelha apenas para Ki-67) não é considerada como um

resultado de teste positivo para o Kit CINtec PLUS Cytology.