Detecção de Enterovírus, por PCR em tempo real, Vários Materiais

Orientações aos clientes

I - Informações sobre o exame

ATENÇÃO: Em amostras de fezes, o exame é realizado somente para pacientes com até 30 dias de vida. Para os demais materiais, não há limite de idade.

• Este teste é realizado em fezes, líquido pleural, líquido pericárdico, plasma e liquor.

II - Critérios de realização

-- Fezes:

• As fezes devem ser retiradas da fralda imediatamente após a evacuação e colocadas em frasco sem conservador.
• No caso de amostras fecais líquidas, utilizar saquinho do tipo "coletor de urina". Após coleta, retirar o saquinho e encaminhar o próprio saquinho para análise.
• Após a coleta, o cliente tem de entregar a amostra em até três horas, refrigerada.

-- Líquido Pleural e Pericárdico:

• A coleta pode ser feita no Laboratório, guiada por ultrassom, com agendamento prévio.
• Amostras não colhidas no Laboratório devem permanecer refrigeradas e ser entregues em até 72 horas após a coleta.

-- Liquor:

• No Laboratório, a coleta desse material requer agendamento prévio.
• Caso seja colhido fora do Laboratório, o liquor tem de ser enviado sob refrigeração, no volume mínimo de 500µL.
• A amostra se mantém estável por 72 horas se mantida refrigerada (2-8°C).

Orientações necessárias

I - Informações sobre o exame

ATENÇÃO: Em amostras de fezes, o exame é realizado somente para pacientes com até 30 dias de vida. Para os demais materiais, não há limite de idade.

• Este teste é realizado em fezes, líquido pleural, líquido pericárdico, plasma e liquor.

II - Critérios de realização

-- Fezes:

• As fezes devem ser retiradas da fralda imediatamente após a evacuação e colocadas em frasco sem conservador.
• No caso de amostras fecais líquidas, utilizar saquinho do tipo "coletor de urina". Após coleta, retirar o saquinho e encaminhar o próprio saquinho para análise.
• Após a coleta, o cliente tem de entregar a amostra em até três horas, refrigerada.

-- Líquido Pleural e Pericárdico:

• A coleta pode ser feita no Fleury, guiada por ultrassom, com agendamento prévio.
• Amostras não colhidas no Fleury devem permanecer refrigeradas e ser entregues em até 72 horas após a coleta.

-- Liquor:

• No Fleury, a coleta desse material requer agendamento prévio.
• Caso seja colhido fora do Fleury, o liquor tem de ser enviado sob refrigeração, no volume mínimo de 1 mL.
• A amostra se mantém estável por 72 horas se mantida refrigerada (2-8°C).

Processamento e adequação da amostra

Pré-tratamento das amostras fecais na DISTRIBUIÇÃO:

• Etiquetar 2 tubos de salina estéril (tampa vermelha);
• Transferir 2 alçadas bem cheias (alça descartável plástica estéril de 10 microlitros) de fezes para cada tubo de salina e girar a alça sobre seu eixo até obter suspensão homogênea;
• Tampar os tubos e enviar congelado ao setor de Métodos Moleculares.

Estabilidade da amostra:

-Temperatura ambiente: não aceitável;

-Refrigerada (4-8°C): 4 horas;

-Congelada (-20°C ou inferior): 72 horas.

Atenção: Para os outros materiais não é necessário pré-tratamento na DISTRIBUIÇÃO.

Encaminhar diretamente para o setor responsável pela realização do exame (Métodos Moleculares).

Plasma:

Centrifugar o material em no máximo 8 horas após a coleta por 15 minutos a 2200g, em temperatura ambiente.

• Transferir todo o plasma, com pipeta estéril e evitando tocar a camada de leucócitos, para um tubo plástico de 4 mL estéril.
• Enviar à seção congelado
• ATENÇÃO:
• Não serão aceitas amostras contendo hemólise devido à interferência na metodologia.
• Não serão aceitos tubos com volume inferior a 0,5 mL de plasma.
• Estabilidade da amostra:

Temperatura ambiente: não aceitável;

Refrigerada (2-8 ºC): 8 horas;

Congelada (-20 ºC): 1 mês.

Método

Reação em cadeia da polimerase (PCR) em tempo real.

Valor de referência

• Negativo (indetectável)

Interpretação e comentários

Este teste detecta uma região não traduzida (5' UTR) comum ao genoma de todos os enterovirus; portanto é capaz de detectar Coxsackievirus, Echovirus, Poliovirus e Enterovirus, mas não permite diferenciá-los.

A presença de RNA de enterovirus nas fezes, isoladamente, não permite o diagnóstico desse agente como causador de uma dada infecção. Os enterovirus circulam habitualmente nas fezes e, identificá-lo nesse material biológico, não permite fazer uma associação causal. Em outros líquidos biológicos, a presença de RNA de enterovírus pode ter valor diagnóstico associadamente a outros dados clínicos e laboratoriais.

Dessa forma, o resultado desse exame deve ser analisado caso a caso.