Clonalidade para células T, Detecção por PCR, sangue total

Orientações necessárias

" Este exame é realizado somente com pedido médico, em sangue.

Materiais colhidos fora do Fleury devem ser entregues no mesmo dia da coleta, refrigeradas.

Observação:

Há restrição de dias e horários para a coleta no Fleury e envio de materiais. Assim, convém consultar a Central de Atendimento ao Cliente previamente.

Processamento e adequação da amostra

• Não manusear.
• Encaminhar para o LARI, refrigerado, no mesmo dia da coleta.

Estabilidade da amostra:

Temperatura ambiente: 7 dias;

Refrigerada (2-8ºC): 7 dias;

Congelada: não aceitável.

Método

• Amplificação por PCR e detecção por eletroforese.

Valor de referência

• Ausência de rearranjo gênico predominante em TCR (policlonal).

Interpretação e comentários

• Esse exame se destina ao diagnóstico de clonalidade em proliferações linfocitárias (pesquisa de rearranjo de cadeia pesada de imunoglobulinas - IgH - quando solicitado para linfoproliferação B, e pesquisa de rearranjo de receptor de células T - TcR - quando solicitado para doenças linfoproliferativas T).
• Proliferações linfóides T freqüentemente representam um desafio diagnóstico para o clínico, haja vista a inexistência de marcador fenotípico de clonalidade nesse subtipo celular. Da mesma maneira, algumas infiltrações linfóides tissulares compostas por células B representam dificuldade diagnóstica, particularmente naqueles casos em que não é possível a análise por citometria de fluxo e a reação imunoistoquímica para pesquisa de cadeias leves ou de imunoglobulinas funciona de maneira duvidosa. A resolução desses casos tem sido auxiliada sobremaneira por meio de estudos com técnicas moleculares.
• A técnica de PCR (reação em cadeia da polimerase) praticamente substituiu o método de Southern Blot para pesquisa de clonalidade em doenças linfoproliferativas, por ser mais rápido, de menor custo e aplicável a pequenas quantidades de material biológico. Um material habitual para análise por PCR é o oriundo de tecido fixado em formol e incluído em parafina. Em doenças clonais haverá a amplificação preferencial do segmento anômalo, produzindo banda única na análise após eletroforese.