Clonalidade para células B, Detecção por PCR, Vários Materiais

Orientações aos clientes

• Este exame é realizado somente com pedido médico, em fragmentos de tecido.
• Materiais colhidos fora do Laboratório devem ser entregues conforme condições abaixo:

-- Fragmento de tecido: deve ser enviado fixado em formol a 10%, incluído ou não em parafina, em recipiente apropriado, identificado com o nome do paciente.

Orientações necessárias

• Este exame é realizado somente com pedido médico, em fragmentos de tecido.
• Materiais colhidos fora do Fleury devem ser entregues conforme condições abaixo:
• Fragmento de tecido: deve ser enviado fixado em formol a 10%, incluído ou não em parafina, em recipiente apropriado, identificado com o nome do paciente.

Processamento e adequação da amostra

AMOSTRA:

Fragmento de tecido incluído ou não em bloco de parafina.

PROCEDIMENTO:

• Fragmento de tecido não incluído em bloco de parafina:

-- Não manusear:

--Enviar para o Setor de Anatomia Patológica (AP)

• Fragmento de tecido incluída em parafina

-- Não manusear. Encaminhar para LARI.

Método

• Amplificação por PCR e detecção por eletroforese.

Valor de referência

• Ausência de rearranjo gênico predominante em IgH (policlonal).

Interpretação e comentários

• Esse exame se destina ao diagnóstico de clonalidade em proliferações linfocitárias (pesquisa de rearranjo de cadeia pesada de imunoglobulinas - IgH - quando solicitado para linfoproliferação B, e pesquisa de rearranjo de receptor de células T - TcR - quando solicitado para doenças linfoproliferativas T).
• Proliferações linfóides T freqüentemente representam um desafio diagnóstico para o clínico, haja vista a inexistência de marcador fenotípico de clonalidade nesse subtipo celular. Da mesma maneira, algumas infiltrações linfóides tissulares compostas por células B representam dificuldade diagnóstica, particularmente naqueles casos em que não é possível a análise por citometria de fluxo e a reação imunoistoquímica para pesquisa de cadeias leves ou de imunoglobulinas funciona de maneira duvidosa. A resolução desses casos tem sido auxiliada sobremaneira por meio de estudos com técnicas moleculares.
• A técnica de PCR (reação em cadeia da polimerase) praticamente substituiu o método de Southern Blot para pesquisa de clonalidade em doenças linfoproliferativas, por ser mais rápido, de menor custo e aplicável a pequenas quantidades de material biológico. Um material habitual para análise por PCR é o oriundo de tecido fixado em formol e incluído em parafina. Em doenças clonais haverá a amplificação preferencial do segmento anômalo, produzindo banda única na análise após eletroforese.