BCR-ABL, Hibridação in situ, Vários Materiais

Orientações aos clientes

• Exame realizado em medula óssea ou sangue periférico.
• A coleta do material pode ser realizada no laboratório, mediante agendamento prévio.
• Material colhido enviado, deverá ser entregue refrigerado até 24 horas após a coleta.

Orientações necessárias

• Exame realizado em medula óssea ou sangue periférico.
• A coleta do material pode ser realizada no laboratório, mediante agendamento prévio.
• Material colhido enviado, deverá ser entregue refrigerado até 24 horas após a coleta.

Processamento e adequação da amostra

MEDULA ÓSSEA:

• Encaminhar a amostra sob refrigeração, o mais rápido possível, à seção, com a folha de trabalho, etiquetas com código de barras, questionário preenchido e cópia da receita médica.

SANGUE PERIFÉRICO:

• Encaminhar a amostra sob refrigeração, o mais rápido possível, à seção, com a folha de trabalho, etiquetas com código de barras, questionário preenchido e cópia da receita médica.

Estabilidade da amostra:

Temperatura ambiente: não aceitável;

Refrigerada (2-8 ºC): 24 horas;

Congelada (-20 ºC): não aceitável.

Método

• Hibridação "in situ" por fluorescência.
• Trata-se de reação onde se usa sonda molecular (seqüência de DNA) marcada com fluorocromo que vai se ligaar ao DNA alvo complementar.
• São analisadas 300 interfases por 2 ou mais observadores.

Valor de referência

I - Sonda: BCR-ABL

• Controle: 10% de células com rearranjo.
• Paciente:

1) Leucemia Mielóide Crônica (LMC) ao diagnóstico, geralmente, cerca de 60-90% de células com rearranjo.

2) Leucemia linfóide aguda (LLA) ou leucemia mielóide aguda (LMA) Philadelphia positivo, porcentagem variável, mas, geralmente > 20%.

3) Demais situações, interpretação de positividade de acordo com doença de base e situação clínica do doente.

II - Sonda BCR-ABL ES ou BCR-ABL DF

• Controle < 5% de células com rearranjo

Interpretação e comentários

• FISH é um método citogenético-molecular no qual se utiliza de uma seqüência de DNA marcada (sonda) complementar ao DNA alvo que se pretende estudar. Pode ser feito tanto em metáfase como em intérfase. FISH com sonda BCR/ABL permite a detecção do rearranjo gênico BCR/ABL ou o equivalente molecular da translocação entre os cromossomos 9 e 22, que resulta no cromossomo Philadelphia. Está indicado em leucemia mielóide crônica (LMC), doenças mieloproliferativas crônicas, leucemia mielóide aguda (LMA) e linfóide aguda (LLA). É método, rápido, sensível e específico.